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PCR實驗室為什么會出現污染?
- 2021-10-18-

PCR實驗室為什么會出現污染?

       PCR實驗室又稱基因擴增實驗室,是一種利用分子生物學技術擴增核酸片段,也可以作為一種特定的核酸體外復制。PCR技術已在傳染病.腫瘤靶向性.生殖遺傳學等領域得到廣泛應用,但由于該技術對核酸進行了大量的檢測,因此,即使少量的污染也很容易導致假陽性結果。二是PCR實驗室的建設要求較高,過程復雜,若中間環節有疏漏,則可能造成假陰性。

在進行PCR實驗室試驗時,容易產生污染,其主要原因有四種:

1.PCR產物污染。在PCR實驗室建設中,這是造成污染的一個常見原因,PCR產物經反復擴增后復制量遠大于PCR的檢測限值,所以即使少量的污染也足以產生假陽性。

2.污染試劑。配制試劑時,試劑因接觸污染的容器.移液管.移液器吸頭.溶液等被污染。

3.要檢測的樣品受到污染。放樣的容器受到污染,或者因容器密封不嚴而污染樣本;第二,污染的移液器或移液器吸頭用于核酸提取時,PCR實驗室被污染了,另外,一些樣品中含有雜質,如果這些雜質擴散到空氣中,就會產生交叉污染。

4.懸浮污染。若懸浮微粒含有病毒和其它污染物,擴散到空氣中,就有可能污染PCR實驗室,這是由于空氣與液體表面摩擦而產生的。開啟瓶蓋,搖動反應管,反復吸入污染進樣器,會形成氣溶膠,造成交叉污染,據計算,一個氣溶膠顆粒可能含有四萬八千份,因此,對氣溶膠造成的污染要特別注意。

5.一旦PCR實驗室被污染,前一次檢測結果失效,其它實驗操作無法進行,因此,必須對污染源進行徹底清理,以取得準確有效的試驗結果。

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